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PCR的兩步法和三步法不同點(diǎn)

日期:2025-01-31 12:18
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摘要: 1、步驟不同:兩步法退火和延伸同時(shí)在60℃-65℃間進(jìn)行,以減少一次升降溫過程,而三步法則分兩次完成。 2、用時(shí)不同:兩步法減少一次升降溫過程,提高了反應(yīng)速度,用時(shí)較短。而三步法則比兩步法用時(shí)更長。 3、適用條件不同:兩步法中,PCR擴(kuò)增區(qū)很短,即使Taq酶活性不是zui佳也能在很短的時(shí)間內(nèi)復(fù)制完成。三步法的PCR擴(kuò)增區(qū)則較長,需要降低系統(tǒng)溫度,引物與DNA模板結(jié)合,形成局部雙鏈。

1、步驟不同:兩步法退火和延伸同時(shí)在60℃-65℃間進(jìn)行,以減少一次升降溫過程,而三步法則分兩次完成。

2、用時(shí)不同:兩步法減少一次升降溫過程,提高了反應(yīng)速度,用時(shí)較短。而三步法則比兩步法用時(shí)更長。

3、適用條件不同:兩步法中,PCR擴(kuò)增區(qū)很短,即使Taq酶活性不是zui佳也能在很短的時(shí)間內(nèi)復(fù)制完成。三步法的PCR擴(kuò)增區(qū)則較長,需要降低系統(tǒng)溫度,引物與DNA模板結(jié)合,形成局部雙鏈。