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服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
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50T流感病毒N6亞型PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
BH-P63220 |
它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（*好用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒 ADP ELISA Kit 血管緊張素Ⅱ受體相關(guān)蛋白抗體英文名稱：AGTRAP 0.2ml
脂肪細(xì)胞脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒 aFABP ELISA Kit 膜粘連蛋白2受體抗體英文名稱：AX2R 0.2ml
脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)ELISA試劑盒 aFABP ELISA Kit 血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體英文名稱：ACEI 0.1ml
脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(FATP5)ELISA試劑盒 FATP5 ELISA Kit 拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子抗體英文名稱：AATF 0.2ml
脂肪酸結(jié)合蛋白4(FABP-4)ELISA試劑盒 FABP-4 ELISA Kit α-1抗胰糜蛋白酶抗體英文名稱：AACT-Alpha1 0.1ml
脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)ELISA試劑盒 FABP ELISA Kit α-1抗胰蛋白酶抗體英文名稱：alpha 1 Antitrypsin 0.1ml
脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)ELISA試劑盒 ATGL ELISA Kit ATP結(jié)合蛋白家族6抗體英文名稱：ABCB6 0.1ml
脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒 ADRP ELISA Kit 三磷酸腺苷結(jié)合盒亞家族G1抗體英文名稱：ABCG1 0.1ml
脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 LBP ELISA Kit 脂聯(lián)素受體2抗體英文名稱：Adiponectin receptor 2 0.1ml
脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒 LPS ELISA Kit ANGEL1蛋白抗體英文名稱：ANGEL1 0.2ml
脂多糖(LPS)ELISA試劑盒 LPS ELISA Kit ANGEL2蛋白抗體英文名稱：ANGEL2 0.2ml
脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒 LPL ELISA Kit ANKLE2蛋白抗體英文名稱：ANKLE2 0.2ml
脂蛋白脂肪酶(LPL)ELISA試劑盒 LPL ELISA Kit 睪特異性錨樣蛋白1抗體英文名稱：ANKMY1 0.2ml
脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 Lp-PL-A2 ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A1抗體英文名稱：ANKRD20A1 0.2ml
脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒 Lp-PLA2 ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體英文名稱：ANKRD13B 0.2ml
50T流感病毒N6亞型PCR檢測(cè)試劑盒白頭翁素 Anemonin 90921-11-2 5mg
蝙蝠葛蘇林堿 daurisoline 70553-76-3 20mg
蝙蝠葛堿 Dauricine 524-17-4 20mg
蝙蝠葛氰苷 Menisdaurin 67765-58-6 10mg
蝙蝠葛新諾林堿 Dauricinoline 30984-80-6 10mg
N,N’-二甲基蝙蝠葛堿碘化物 N,N’-dimethyldauricine iodide 10mg
乙酰蝙蝠葛蘇林堿 O-diacetyldaurisoline 10mg
白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ Atractylenolide 1 73069-13-3 20mg
白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ Atractylenolide II 73069-14-4 20mg
白術(shù)內(nèi)酯III Atractylenolide III 73030-71-4 20mg
蒼術(shù)素 Atractylodin 55290-63-6 20mg
蒼術(shù)苷A Atractyloside A 126054-77-1 20mg
茅蒼術(shù)醇 Hinesol 23811-08-7 10mg
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。