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產(chǎn)品詳情

  • 產(chǎn)品名稱：TM3小鼠睪丸間質(zhì)細胞

  • 產(chǎn)品型號：P-X1114
  • 產(chǎn)品廠商：派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹：
TM3小鼠睪丸間質(zhì)細胞公司正在出售的產(chǎn)品：L Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細胞貼壁細胞成纖維細胞樣L Wnt-3A:L Wnt3A小鼠細胞系組織來源：組織：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織及脂肪；品系：C3H/An人肺炎支原體抗體(MP-Ab)elisa分析檢測試劑盒細胞結(jié)合（酯化）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒
詳情介紹：

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

TM3小鼠睪丸間質(zhì)細胞

英文簡稱

規(guī)格

貨號

TM3:TM3

1×106

P-X1114

產(chǎn)品詳情：

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

生長培養(yǎng)基 DMEM/F12＋5% HS＋2.5% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項 該細胞貼壁松散，操作時請盡量輕柔；換液時需預熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細胞團，為正常現(xiàn)象，請按照收貨注意事項處理。

背景描述 TM3細胞在LH作用下cAMP產(chǎn)量升高，但對促卵泡激su沒有響應。TM3細胞對LH的響應持續(xù)時間與血清批次有關(guān)；在LH存在下，TM3細胞可以代謝膽gu醇。

年齡（性別） 雄性，11-13天

組織來源 睪丸間質(zhì)

細胞類型 自發(fā)永生化細胞

生物等級 1

致瘤性 No, The cells were not tumorigenic in immunosuppressed mice, but did form colonies in semisolid medium.

受體表達情況 Luteinizing hormone (LH); epidermal growth factor (EGF); androgen receptor, positive; estrogen receptor, positive; progesterone receptor, positive

基因表達情況 prostaglandin F2a

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1714 ECACC; 91060526

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細胞處理：

1）凍存細胞的復蘇：：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。下面T25瓶為例：
1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實驗原理：

公司正在出售的產(chǎn)品：

魚胰島素樣生長因子II(IGF2)elisa分析檢測試劑盒

LMBRD2蛋白抗體

IGF2 ELISA kit

血小板源性生長因子D(脊髓源性生長因子B)  Anti-SCDGFB/PDGF-D

人垂草扁桃酸(VMA)elisa分析檢測試劑盒

BMP8b

HumanVMAELISAKit

骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體

環(huán)指蛋白13抗體  Anti-RNF13

LMBRD2

核苷酸結(jié)合蛋白2抗體  Anti-NUBP2

SOX30

鋅指蛋白750抗體  Anti-ZNF750

CRB3蛋白抗體

轉(zhuǎn)錄因子SOX30抗體

CRB3

APC標記小鼠IgG（型對照)

STAC1蛋白抗體  Anti-STAC

Mouse IgG / APC

B細胞誘導成熟蛋白1抗體  Anti-PRDM1/Blimp1

鋅指蛋白837抗體

脯氨酰羧肽酶抗體  Anti-PRCP

ZNF837

端粒體復制結(jié)合因子1抗體  Anti-TRBF1/TRF1

大鼠顆粒酶B(Gzms-B)elisa分析檢測試劑盒

小鼠Tau蛋白elisa分析檢測試劑盒

Gzms-B ELISA Kit

TM3小鼠睪丸間質(zhì)細胞MouseTauProteinsELISAkit

蜥蜴三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa分析檢測試劑盒

人白介素7(IL-7)elisa分析檢測試劑盒

T3 ELISA kit

HumanIL-7ELISAkit

實驗步驟：

1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細胞進行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進行細胞鋪板，轉(zhuǎn)染時細胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系。



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