HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞上海博湖生物科技有限公司

主營產(chǎn)品：

生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品，PCR試劑盒，?核酸檢測(cè)試劑盒，熒光定量檢測(cè)試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測(cè)試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測(cè)試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測(cè)試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。

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產(chǎn)品詳情

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產(chǎn)品名稱：HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞
產(chǎn)品型號(hào)：P-X763
產(chǎn)品**：派瑞曼
產(chǎn)品文檔：

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簡單介紹：

HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：HeLa.S3人宮頸癌細(xì)胞貼壁生長上皮細(xì)胞樣HeLa.S3:HeLaS3人細(xì)胞系組織來源：人丙酮醛(MGO)elisa分析檢測(cè)試劑盒植物脊髓過氧化酶（MPO）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

詳情介紹：

HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞

英文名稱

HL-7702[L-02]:HL7702L02

產(chǎn)品形態(tài)

上皮細(xì)胞樣貼壁生長

貨號(hào)

P-X763

產(chǎn)品分類

人細(xì)胞系

規(guī)格

1×106

包裝

株

來源

肝

用途

僅供科研研究使用

產(chǎn)品詳情：

細(xì)胞別稱：HL-7702; HL7702；人肝細(xì)胞

種屬來源：人

年齡性別：

組織來源：肝

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡介：HL-7702細(xì)胞是人正常肝細(xì)胞；HL-7702細(xì)胞群體倍增時(shí)間：約為20小時(shí)，細(xì)胞形態(tài)：呈上皮樣細(xì)胞。在電子顯微鏡下，亦顯示上皮細(xì)胞所具有的橋粒和張力原纖維，HL-7702細(xì)胞增殖迅速，AFP與CK-19表達(dá)陰性，ALB表達(dá)在10μg/ml水平，部分細(xì)胞多次傳代后發(fā)生形態(tài)變異，ALB表達(dá)缺失。(STR檢測(cè)位點(diǎn)同HELA)

生物等級(jí)：

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：

培養(yǎng)基：80%RPMI-1640+20%FBS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二．細(xì)胞處理：

1）凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜

。天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存:收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例：
1、細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，來決定細(xì)胞的凍存密度。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml.
2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。
3、將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

實(shí)驗(yàn)原理：

實(shí)驗(yàn)步驟：

1 將目的基因構(gòu)建到合適的慢病毒載體上，利用293T細(xì)胞進(jìn)行慢病毒包裝，獲得含目的基因的慢病毒；
2 轉(zhuǎn)染前24 h進(jìn)行細(xì)胞鋪板，轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度控制在80%左右；
3 天加入適量病毒懸液感染細(xì)胞，并置于37 ℃，5% CO2培養(yǎng)箱中孵育；
4 24 h后用新鮮培養(yǎng)基替換含有病毒的培養(yǎng)基，并繼續(xù)培養(yǎng)；
5 在轉(zhuǎn)染3-4天后開始加藥篩選培養(yǎng)，直至顯微鏡下觀察熒光細(xì)胞比例為100%，獲得穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系。

公司正在出售的產(chǎn)品：

蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(Vtg)elisa分析檢測(cè)試劑盒

艾滋病病毒1誘導(dǎo)蛋白HIN1抗體

Vtg ELISA Kit

組織因子途徑抑制劑-2抗體 Anti-TFPI-2

人白介素1β前體(pro-IL1B)elisa分析檢測(cè)試劑盒

CACYBP

pro-IL1BELISAKit

周期蛋白結(jié)合蛋白抗體

腫瘤抑制基因抗體（野生型P53） Anti-P53(wt-p53)

OTUD4/HIV 1 induced protein HIN 1

p53結(jié)合蛋白1抗體 Anti-p53BP1/53BP1

LIM kinase 2b

神經(jīng)元特異性蛋白3抗體 Anti-Septin 3

抗志賀大腸桿菌O139抗體（仔豬水腫病志賀大腸桿菌O139）

LIM結(jié)構(gòu)域激酶2抗體

E.coli O139

大鼠KI-67 elisa分析檢測(cè)試劑盒

鋅指蛋白263抗體 Anti-ZNF263

Rat KI-67 ELISA kit

分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體 Anti-Nocturnin

人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)elisa分析檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞周期依賴性激酶抑制相關(guān)蛋白抗體 Anti-RPRD1A/P15RS

HumanGSH-PxELISAKit

突觸結(jié)合蛋白14抗體 Anti-Synaptotagmin-14

甲基紅檢測(cè)試劑盒

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-8 （MMP-8）elisa檢測(cè)試劑盒

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa分析檢測(cè)試劑盒

HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞豬白介素1α(IL-1α)elisa分析檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞趨化因子抗體

10號(hào)染色體開放閱讀框63抗體

Lymphotactin

C10orf63

姓名：

電話：

您的需求：

英文名稱	HL-7702[L-02]:HL7702L02	產(chǎn)品形態(tài)	上皮細(xì)胞樣貼壁生長
貨號(hào)	P-X763	產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系
規(guī)格	1×106	包裝	株
來源	肝	用途	僅供科研研究使用

蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(Vtg)elisa分析檢測(cè)試劑盒	艾滋病病毒1誘導(dǎo)蛋白HIN1抗體
Vtg ELISA Kit	組織因子途徑抑制劑-2抗體 Anti-TFPI-2
人白介素1β前體(pro-IL1B)elisa分析檢測(cè)試劑盒	CACYBP
pro-IL1BELISAKit	周期蛋白結(jié)合蛋白抗體
腫瘤抑制基因抗體（野生型P53） Anti-P53(wt-p53)	OTUD4/HIV 1 induced protein HIN 1
p53結(jié)合蛋白1抗體 Anti-p53BP1/53BP1	LIM kinase 2b
神經(jīng)元特異性蛋白3抗體 Anti-Septin 3	抗志賀大腸桿菌O139抗體（仔豬水腫病志賀大腸桿菌O139）
LIM結(jié)構(gòu)域激酶2抗體	E.coli O139
大鼠KI-67 elisa分析檢測(cè)試劑盒	鋅指蛋白263抗體 Anti-ZNF263
Rat KI-67 ELISA kit	分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體 Anti-Nocturnin
人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)elisa分析檢測(cè)試劑盒	細(xì)胞周期依賴性激酶抑制相關(guān)蛋白抗體 Anti-RPRD1A/P15RS
HumanGSH-PxELISAKit	突觸結(jié)合蛋白14抗體 Anti-Synaptotagmin-14
甲基紅檢測(cè)試劑盒	大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-8 （MMP-8）elisa檢測(cè)試劑盒
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa分析檢測(cè)試劑盒	HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞豬白介素1α(IL-1α)elisa分析檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞趨化因子抗體	10號(hào)染色體開放閱讀框63抗體
Lymphotactin	C10orf63

產(chǎn)品名稱：HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞