需自備的儀器和用品：

高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器（水系，50個(gè)，0.22μm）、濾膜（水系1個(gè)，0.45μm）、

鈣柱（Carbomix Ca-NP10，7.8 ×300 mm）、可調(diào)式移液器、樣品瓶（50個(gè)，2mL）、超純水。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡便：操作時(shí)間短，48-50T，可測40例樣本左右，96-100T,可測80例樣本左右；

2、取樣量微：常規(guī)操作取樣量50l， 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測，部分試劑盒取樣多少請；

3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效；

4、再現(xiàn)性好：20倍稀釋線性仍然良好；

5、回收試驗(yàn)： X =99%；

6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)；

7、測試面廣：可測動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等，部分試劑盒適用于檢測植物。

測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便 不時(shí)觀察，待對照管顯色適當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測試面廣：可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

K氏培養(yǎng)基 K Agar 250g　人  粘附分子3(Cell adhesion molecule 3)ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL

YSG培養(yǎng)基基礎(chǔ)（日本標(biāo)準(zhǔn)）  250g　ELISA Kit for Human Cell adhesion molecule 3 0.312-20 ng/mL

酸化K氏培養(yǎng)基 K's medium acidification 250g　人線粒體25-羧基維生素D-1α羥化酶(CYP27B1)ELISA試劑盒 15.6-1000 pg/mL

原材料系列   ELISA Kit for Human 25-hydroxyvitamin D-1 alpha hydroxylase, mitochondrial 15.6-1000 pg/mL

胰蛋白胨 Tryptone 250g　人線粒體  色素c氧化酶亞基5 a（Cytochrome c oxidase subunit 5A, mitochondrial）ELISA試劑盒 0.312-20 ng/mL

酪蛋白胨 Peptone from Casein 250g　ELISA Kit for Human Cytochrome c oxidase subunit 5A, mitochondrial 0.312-20 ng/mL

牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250g　人  色素B5(Cytochrome b5)ELISA試劑盒 15.6-1000 pg/mL

瓊脂粉 Agar Bacteriological 250g　ELISA Kit for Human Cytochrome b5 15.6-1000 pg/mL

大豆蛋白胨 Peptone from Soybean Meal 250g　人  色素P450 1A1(Cytochrome P450 1A1)ELISA試劑盒 1.56-100 ng/mL

月示蛋白胨 Proteose Peptone 250g　ELISA Kit for Human Cytochrome P450 1A1 1.56-100 ng/mL

三號(hào)膽鹽 No. 3 Bile Salt 100g　人NADH  色素b5還原酶2(b5R.2)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL

牛心浸粉 Beef Heart Infusion 100g　ELISA Kit for Human NADH-cytochrome b5 reductase 2 0.156-10 ng/mL

肝浸粉 Liver Infusion 100g　人酪蛋白激酶II亞基α(CK II alpha)ELISA試劑盒 0.156-10 ng/mL

果膠酶測試盒Plexin A1  神經(jīng)叢蛋白A1抗體規(guī)格: 0.2ml

Plexin A2  神經(jīng)叢蛋白A2抗體規(guī)格: 0.1ml

Plexin B1  神經(jīng)叢蛋白B1抗體規(guī)格: 0.1ml

Plectin  網(wǎng)蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

PLGF/PIGF (human)  胎盤生長相關(guān)抗體（人）規(guī)格: 0.1ml

PLGF/PIGF (mouse, rat, pig)  胎盤生長因子抗體（小鼠、大鼠、豬）規(guī)格: 0.1ml

PLGF  胎盤生長因子抗體規(guī)格: 0.1ml

PLK1  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-PLK1(Thr210)  磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-PLK1 (Ser137)  磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-PLK1(Ser482+Ser486+Ser490)  磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體規(guī)格: 0.1ml

PML/TRIM19  早幼粒  白血病蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

PMP22  外周髓鞘蛋白-22抗體規(guī)格: 0.1ml

注意事項(xiàng)：

①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。