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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:細胞核蛋白提取試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:BH-D85228
  • 產(chǎn)品**:派瑞曼
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
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詳情介紹:

自備儀器和試劑耗材:

儀器準備:

1.離心機

2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備: 

1.PBS 緩沖液 

2.蛋白定量試劑盒
耗材準備: 

1.離心管

2.吸頭
3.一次性手套

產(chǎn)品簡介:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

適用樣本

保存溫度

貨號

細胞核蛋白提取試劑盒

50T/100T

WB,IP等

動物細胞

2-8℃

BH-D85228

使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

操作步驟:

A:組織中提取

1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。

2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。

3.至步驟 2。

B:細胞中提取

1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。

2.至步驟 1。

步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。

步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。

步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。

步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。

步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。

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細胞核蛋白提取試劑盒 熒光素PE標記低分子量神經(jīng)絲蛋白抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-NF-L/PE

熒光素標記一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-NOS-1/bNOS/neuronal NOS/nNOS /FITC

熒光素標記磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-Phospho-NEDD4L (Ser342) /FITC

熒光素標記兔抗抑癌基因p16抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-P16/FITC

熒光素標記抗血小板活化因子受體抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-PAFR/FITC

熒光素標記蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  anti-PDI/FITC

熒光素標記磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) /FITC

熒光素標記抗磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-phospho-P53(pSer392)/FITC

熒光素標記神經(jīng)叢蛋白A1抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-Plexin A1/Plexin 1/FITC

辣根過氧化物酶標記抗三聚氰胺抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-Melamine/HRP

熒光素標記Rbms3 protein抗體IgG 規(guī)格:  0.2ml  Anti-Rbms3 protein/FITC

DL-Malic acid DL-蘋果酸 25g  瓶

Ethidium Brmide 溴化乙錠 (EB) 100mg  支

Solar Fluor 680(效果同Alexa Fluor 680) 5 mg  支

SOD 超氧化物岐化酶(來源牛紅) 15KU  瓶

L-Arginine HCL L-精氨酸鹽酸鹽 25g  瓶

通用引物1492R (10uM) 250ul  支

SABC(兔IgG)-POD kit 100-200T  盒

豚鼠IgG干粉 10mg  支

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